承德四方苗圃壹伍貳貳壹

　　常見污染源

　　組織培養(yǎng)過程中的污染源主要有以下幾種：（1）戶外風(fēng)大，菌類進(jìn)屋機(jī)會(huì)多。有風(fēng)就有沙，有沙就有塵，有塵就有菌，菌塵共存，這是菌類進(jìn)屋的主要原因之一。（2）屋內(nèi)太潮，菌類繁衍多。需保持室內(nèi)空氣干燥，如使用空調(diào)“除濕”功能，也可減少真菌生長繁殖。（3）人員帶菌多。在整個(gè)操作室內(nèi)，人員可說是較大的帶菌者，不管在毛發(fā)或是衣服等地方，都隱藏著數(shù)不清的菌類。在進(jìn)入操作室前，較好能對(duì)作業(yè)人員進(jìn)行清潔處理，比如換上干凈的白大褂，換上實(shí)驗(yàn)室的鞋，衣服鞋每星期洗一次，上超凈臺(tái)前手要用肥皂清洗兩遍，接種前手再用酒精擦拭一遍。（4）屋內(nèi)不干凈。紫外線能殺滅或抑制真菌生長，因此應(yīng)在每次接種前進(jìn)行20分鐘的紫外燈消毒。（5）清理屋內(nèi)帶菌組培苗。在植物病害中，真菌所引起的病害尤其嚴(yán)重，且因會(huì)產(chǎn)生孢子，隨著空氣飄散。一旦落入適當(dāng)?shù)沫h(huán)境下，一粒小小的孢子便會(huì)擴(kuò)大成一個(gè)菌落，污染整個(gè)組織培養(yǎng)瓶。因此一旦有真菌污染的組培苗，就要用高壓滅菌器徹底消滅，以防擴(kuò)散。（6）接種不正確。不正確操作也會(huì)增加污染機(jī)率，如開蓋太快，滅菌不夠，操作過慢等。接種過程應(yīng)該輕開蓋，快操作。

　　污染原因及污染苗搶救

　　若污染菌類是零星分散在培養(yǎng)基中，則可確定是人為引起的污染，比如培養(yǎng)基滅菌不徹底；超凈工作臺(tái)長時(shí)間不換濾網(wǎng)，致使凈化能力降低；接種用具滅菌不徹底；操作不正確，動(dòng)作生硬緩慢，開瓶時(shí)間太久，接種臺(tái)擺放物品雜亂，操作中心在人體范圍之內(nèi)；接種室長期不滅菌，菌類太多等。

　　若污染菌類是從材料周圍長起，則可證明是植物材料帶菌引起�？赡苁墙臃N用具滅菌不徹底，接種時(shí)材料被污染；或者是未及時(shí)發(fā)現(xiàn)污染苗，接種過程交叉感染等。

　　若菌類從材料培養(yǎng)基以上部分長起，而不是從培養(yǎng)基先長起，且發(fā)生在5天以后，則說明是材料帶的內(nèi)生菌。若從培養(yǎng)基以下開始長菌，發(fā)生時(shí)間較早，且有從里向外的趨勢(shì)，則說明是切口引起的污染，原因可能是滅完菌后，未剪去兩個(gè)切口或雖剪但器具帶菌。

　　真菌污染后，如果已形成孢子，則必須經(jīng)高壓滅菌后扔掉，即使僅形成菌絲也應(yīng)處理后扔掉，因?yàn)榫z能夠達(dá)到材料內(nèi)部，因此，真菌污染是滅絕性的。如果是細(xì)菌污染，由于細(xì)菌繁殖是靠芽孢，細(xì)菌不會(huì)彌散在整個(gè)空間，因此只要及時(shí)發(fā)現(xiàn)，可將材料上部未感菌的部分剪下轉(zhuǎn)接，材料仍可以用。

　　用抗生素等殺菌藥劑進(jìn)行處理，這種方式雖有不少報(bào)道，但至今還未發(fā)現(xiàn)那種抗生素能夠?qū)Ω鞣N菌都有效，并且也會(huì)影響植物材料的正常生長分化。還有一些藥劑雖然殺菌效果好，但往往容易引起鹽害，也無法利用。